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兔子免疫球蛋白M IgM ELISA試劑盒 rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA試劑盒
更新時間:2024-08-17;廠商性質:經銷商;覽量:651
兔子免疫球蛋白MELISA試劑盒
(1) 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴散或免疫電泳法,使抗原與抗體形成沉淀線,經PBS漂洗1天,再以蒸餾水浸泡1小時,將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色,如果出現應有的顏色反應,再用生理鹽水浸泡,顏色仍然不褪,表示結合物既有酶的活性,也有抗體活性。良好的結合物在顯色后,瓊擴滴度應在1:16以上。另一個測定方法是用系列稀釋的酶標抗體直接以ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)方法進行方陣滴定,此法不僅可以測定標記效果,還可以確定酶標抗體的使用濃度。 (2) 結合物的定量測定 一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定,然后按下列公式計算: 酶量(mg/ml)=OD403×0.42 IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62 對于過碘酸鈉氧化法制備的標記抗體量,按下列公式計算: IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62 已知酶量和IgG量后,即可計算出標記抗體的摩爾(mol)比值。 HRP/IgG摩爾比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4 結合物中酶總量=HRP(mg/ml)×結合物溶液量 結合物產率=結合物中酶總量/標記時加入的酶量×100% 用于ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)的結合物的酶量為400(g/ml時效果一般,為500(g/ml時效果較好,達 1000(g/ml時效果。mol.比值由于結合物中含的IgG并不*可靠,所以不能作為主要參數。一般認為mol.比值為0.7時效果一般,1.0時效果較好,1.5-2.0時。酶結合率為 7%時效果一般,為9%-10%較好,達30%以上時。
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