簡要描述:
超氧陰離子清除能力測試盒作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。
更新時間:2024-09-03;廠商性質:經銷商;覽量:1022
商品詳情:
超氧陰離子清除能力測試盒測定意義:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3273 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3273-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
膠原蛋白ⅡELISA試劑盒 HCBⅡ免費代測試劑
降脂素ELISA試劑盒 Adipsin免費代測試劑
降解加速因子ELISA試劑盒 DAF免費代測試劑
堿性胎兒蛋白ELISA試劑盒 BFP免費代測試劑
堿性拉鏈轉錄因子ATF樣蛋白ELISA試劑盒 BATF免費代測試劑
間變性淋巴瘤激酶ELISA試劑盒 ALK免費代測試劑
間α-胰抑制因子重鏈H1ELISA試劑盒 ITIH1免費代測試劑
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甲狀腺抗體ELISA試劑盒 TAb免費代測試劑
甲狀腺激素受體βELISA試劑盒 THRb免費代測試劑
甲狀腺非肽激素抗體ELISA試劑盒 THAA免費代測試劑
甲狀腺刺激免疫球蛋白ELISA試劑盒 TSI免費代測試劑
甲狀旁腺激素樣蛋白ELISA試劑盒 PLP免費代測試劑
甲狀旁腺激素1受體ELISA試劑盒 PTH1R免費代測試劑
甲狀旁腺激素1-34ELISA試劑盒 PTH 1-34免費代測試劑
超氧陰離子清除能力測試盒土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測試盒100管/48樣 微量法
土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測試盒50管/24樣 可見分光光度法
土壤β葡萄糖苷酶(Sβ GC)/纖維二糖酶測試盒100管/96樣熒光法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測試盒100管/48樣 微量法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測試盒50管/24樣 可見分光光度法
土壤纖維素酶(SCL)/羧甲基纖維素酶測試盒100管/96樣熒光法
土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒100管/48樣 微量法
土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒50管/24樣 紫外分光光度法
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