簡要描述:
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導細胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應用于植物病理和逆境生理研究。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:971
商品詳情:
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒測定意義:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導細胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應用于植物病理和逆境生理研究。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3241 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3241-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,內切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計算其酶活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
CD134分子ELISA試劑盒 CD134免費代測試劑
CD10分子ELISA試劑盒 CD10免費代測試劑
CC趨化因子受體7ELISA試劑盒 CCR7免費代測試劑
CC趨化因子受體5ELISA試劑盒 CCR5免費代測試劑
CC趨化因子受體1ELISA試劑盒 CCR1免費代測試劑
CC趨化因子7ELISA試劑盒 CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7免費代測試劑
CC趨化因子5ELISA試劑盒 CCL5/D17S136E/SCYA5免費代測試劑
CCAAT增強子結合蛋白εELISA試劑盒 C/EBPε免費代測試劑
CCAAT增強子結合蛋白δELISA試劑盒 C/EBPδ免費代測試劑
cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環磷二酯酶10AELISA試劑盒 PDE10A免費代測試劑
Ca2+激活K+通道蛋白2ELISA試劑盒 KCNN2免費代測試劑
C4結合蛋白ELISA試劑盒 C4BP免費代測試劑
C1q/TNF相關蛋白3ELISA試劑盒 Cartonectin/CTRP3/CORS-26免費代測試劑
B細胞受體相關蛋白31ELISA試劑盒 BCAP31免費代測試劑
B細胞受體ELISA試劑盒 BCR免費代測試劑
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒過氧化氫(H2O2)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
過氧化氫(H2O2)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
線粒體活性氧產生速率(ROS)比色法檢測試劑盒熒光法100管/96樣
脂質過氧化物(LPO)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
脂質過氧化物(LPO)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
丙二醛(MDA)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
丙二醛(MDA)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
氧化酶(XOD)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
氧化酶(XOD)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣