簡(jiǎn)要描述:
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5是P450酶系的兩個(gè)血紅素蛋白,其比值的變化與P450代謝活性密切相關(guān)。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1167
商品詳情:
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒測(cè)定意義:
細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5是P450酶系的兩個(gè)血紅素蛋白,其比值的變化與P450代謝活性密切相關(guān)。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3476 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3476-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測(cè)定原理:
氧化型細(xì)胞色素b5經(jīng)連二亞硫酸鈉還原后,在424nm處有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定424nm和490nm處吸光值的差異,即可計(jì)算出細(xì)胞色素b5的含量。
自備儀器和用品:
普通離心機(jī),超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
整合suβ4結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒 ITGB4BP ELISA Kit
整合suαⅤβ3檢測(cè)試劑盒 ITG αⅤβ3 ELISA Kit
整合suA5檢測(cè)試劑盒 ITGA5 ELISA Kit
真胰島su檢測(cè)試劑盒 TI ELISA Kit
真核細(xì)胞延伸因子2檢測(cè)試劑盒 eEF2 ELISA Kit
真核起始因子4A-II檢測(cè)試劑盒 EIF4A2/DDX2B/EIF4F ELISA Kit
真核翻譯起始因子3a檢測(cè)試劑盒 eIF3a ELISA Kit
長(zhǎng)效甲狀腺刺激su檢測(cè)試劑盒 LATS ELISA Kit
張力蛋白4檢測(cè)試劑盒 TNS4 ELISA Kit
粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測(cè)試劑盒 MEC/CCL28 ELISA Kit
粘蛋白3檢測(cè)試劑盒 MUC3 ELISA Kit
增殖誘導(dǎo)配體檢測(cè)試劑盒 APRIL ELISA Kit
早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子1檢測(cè)試劑盒 EGR1 ELISA Kit
早期前列腺癌抗原2檢測(cè)試劑盒 EPCA2 ELISA Kit
早期活化抗原CD69檢測(cè)試劑盒 CD69 ELISA Kit
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒100T/96S木質(zhì)su過(guò)氧化物酶(LiP)測(cè)試盒/微量法
50管/48樣木質(zhì)su含量測(cè)試盒/分光光度法
100管/96樣木質(zhì)su含量測(cè)試盒/微量法
80T/35樣內(nèi)毒su測(cè)試盒/鱟試劑法
50管/24樣內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)測(cè)試盒/分光光度法
100管/48樣內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)測(cè)試盒/微量法
50管/48樣內(nèi)源性硫化氫(H2S)測(cè)試盒
50管/48樣內(nèi)源性一氧化碳(CO)測(cè)試盒(測(cè)全血)/比色法
100管/50樣內(nèi)源性一氧化碳(CO)測(cè)試盒(測(cè)血清/血漿)/比色法