伊人伊人伊人-亚洲伊人久久一次-天堂伊人网-伊人国产在线观看-在线播放精品-在线播放国产一区

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒揭示蛋白質純化與結晶的培養(yǎng)原理
ELISA試劑盒揭示蛋白質純化與結晶的培養(yǎng)原理
更新時間:2014-10-10   點擊次數:757次

ELISA試劑盒揭示蛋白質純化與結晶的培養(yǎng)原理

     獲得蛋白質的晶體結構的*個瓶頸,就是制備大量純化的蛋白質(>10mg),其濃度通常在10mg/ml以上,并以此為基礎進行結晶條件的篩選。運用重組基因的技術,將特定基因以選殖(clone)的方式嵌入表現載體內,此一載體通常具有易于調控的特性。之后再將帶有特定基因的載體送入可快速生長的菌體中,如大腸桿菌,在菌體快速生長的同時,也大量表現載體上的基因所解譯出之蛋白質。一般而言純度越高的蛋白質比較有機會形成晶體,因此純化蛋白質的步驟就成為一個重要的決定因素。

    在取得高純度的蛋白質溶液后,接下來就是晶體的培養(yǎng)。蛋白質晶體與其他化合物晶體的形成類似,是在飽和溶液中慢慢產生的,每一種蛋白質養(yǎng)晶的條件皆有所差異,影響晶體形成的變量很多,包含化學上的變量,如酸堿度、沉淀劑種類、離子濃度、蛋白質濃度等;物理上的變數,如溶液達成過飽和狀態(tài)的速率、溫度等;及生化上的變數,如蛋白質所需的金屬離子或抑制劑、蛋白質的聚合狀態(tài)、等電點等,皆是養(yǎng)晶時的測試條件。截至目前為止,并無一套理論可以預測結晶的條件,所以必須不斷測試各種養(yǎng)晶溶液的組合后,才可能得到一顆的單一晶體。

    蛋白質晶體的培養(yǎng),通常是利用氣相擴散法(Vapor Diffusion 
Method)的原理來達成;也就是將含有高濃度的蛋白質(10~50mg/ml)溶液加入適當的溶劑,慢慢降低蛋白質的溶解度,使其接近自發(fā)性的沈淀狀態(tài)時,蛋白質分子將在整齊的堆棧下形成晶體。舉例來說,我們將蛋白質溶于低濃度(~1.0M)的硫酸銨溶液中,將它放置于一密閉含有高濃度(~2.0M)硫酸銨溶液的容器中,由氣相平衡,可以緩慢提高蛋白質溶液中硫酸銨的濃度,進而達成結晶的目的。

    蛋白質晶體在外觀上與其他晶體并無明顯不同之處,但在晶體的內部,卻有很大的差異。一般而言,蛋白質晶體除了蛋白質分子外,其他的空間則充滿約40%至60%之間的水溶液,其液態(tài)的成分不僅使晶體易碎,也容易使蛋白質分子在晶格排列上有不規(guī)則的情形出現,造成晶體處理時的困難及繞射數據上的搜集不易等缺點。但也由于高含水量的特性,讓蛋白質分子在晶體內與水溶液中的狀態(tài),極為相似。所以由晶體所解出的蛋白質結構,基本上可視為自然狀態(tài)下的結構。

250克    Bile Esculin Azide Agar    膽鹽七葉苷疊氮鈉瓊脂    用于腸球菌的快速選擇性分離培養(yǎng)和計數
250克    M-Enerococcus Agar    M-腸球菌瓊脂    用于濾膜法或直接平板法,從自來水、食品或其他標本中分離腸球菌
250克    BPW    緩沖蛋白胨水增菌液    沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)
250克    TSYEB    胰酶大豆酵母浸膏肉湯    用于單核細胞和李斯特菌增菌培養(yǎng)
250克    TSYEA    胰酶大豆酵母浸膏瓊脂    用于單核細胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)
250克    Listeria Enrichment Broth Base    李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎    李氏菌二步增菌
250克    PALCAM Agar    PALCAM瓊脂    單增李氏菌的選擇性分離
250克    Oxford Agar Base    OXA基礎    單增李氏菌的選擇性分離
250克    LPM Agar    李氏LPM瓊脂    單增李氏菌的選擇性分離
250克    Half Fraser Medium    Half Fraser培養(yǎng)基    李氏菌的增菌培養(yǎng)
250克    Motility Test Medium(Semisolid)    SIM培養(yǎng)基    李氏菌動力觀察,H抗原位相變異試驗;硫化氫、動力、吲哚試驗
250克    Modified Mcbride Agar Base    改良McBride瓊脂培養(yǎng)基    單增李氏菌選擇性分離
250克    Fraser Medium    Fraser培養(yǎng)基    李氏菌的增菌培養(yǎng)
250克    MBPW    改良緩沖蛋白胨水    李氏菌的增殖
250克    Citrate Agar    檸檬酸鹽培養(yǎng)基    大腸桿菌和產氣桿菌的鑒別
250克    Urease Agar Base    尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎    細菌脲酶檢測,腸桿菌鑒別
100克    Potassium Cyanide Medium Base    KCN培養(yǎng)基基礎    用于鑒別腸道細菌KCN抑制試驗
250克    MR VP Broth    MR-VP試驗用培養(yǎng)基    腸桿菌科細菌的甲基紅和VP試驗

 

化工儀器網

推薦收藏該企業(yè)網站
主站蜘蛛池模板: 最新国产精品精品视频| 在线精品国产一区二区| 国产激情视频在线| 欧美日韩国产乱了伦| 亚洲综合无码一区二区| 亚洲精品高清在线观看| 99视频都是精品热在线播放| 亚洲午夜精品| 欧美 日韩 高清| 91久久国产| 欧美日韩一| 午夜不卡视频| 免费国产高清视频| 亚洲免费网站观看视频| 国产91在线 | 中文| 成人日韩| 91精品一区二区三区在线播放| 亚洲精品国产精品乱码不97| 国产成人亚洲综合91精品555| 国产精品久久久久久久专区| 欧美一区二区在线观看免费网站| 不卡中文字幕在线观看| 亚欧美色| 欧美日韩中文| 国产精品久久久久久久免费| 91在线一区二区三区| 国产一区二区三区在线视频| 国产成人精品999在线| 日本a中文字幕| 亚洲色图日韩精品| 黄网站免费观看| 国产日本在线观看| 亚欧精品在线观看| 国产亚洲一欧美一区二区三区| 免费一看一级毛片| 欧美亚洲专区| 国产精品成人一区二区不卡| 亚洲成色999久久网站| 亚洲欧美在线免费观看| 国产在线一区二区三区四区| 国产精品国产三级国产a|